Herstellung einer Genbank für Streptococcus mitits SK138

Streptococcus mitis scheint bei der frühen Plaquebildung sowie bei der Inkorporation von Speichel-alpha-Amylase in die Plaque eine bedeutende Rolle zu spielen. Für die molekulare Untersuchung von Faktoren, welche bei diesen kariesrelevanten Prozessen beteiligt sind, wurde eine Genbank hergestellt. Fragmentierte chromosomale DNS (Desoxyribonukleinsäure) von Strep. mitis SK138 wurde in den Lambda gt11-Vektor insertiert, welcher anschließend in Phagenköpfe verpackt wurde. Die resultierende Phagenbank enthielt zu ca. 75% rekombinante Phagen und hatte gegenüber der Größe des Genoms etwa 165fachen Überschuß durchsuchbarer Basenpaare. Die mit dieser Phagenbank in Escherichia coli hergestellte Genbank exprimierte zu nahezu 100% streptokokkale Proteine. Mit Speichel und Anti-Speichel-alpha-Amylase-Antikörper untersuchte Plaquelifts zeigten unter ca. 1000 getesteten Phagenplaques zwei, welche Amylase banden. Die Ergebnisse deuten darauf hin, daß die Genbank mit DNS-Sonden nach einem gewünschten Gen, und mit Antikörpern, Enzymtests oder spezifischen Liganden nach einem gewünschten Protein durchsucht werden kann. Sie ist ein wichtiges Hilfsmittel für die molekulare Untersuchung kariesrelevanter und anderer Faktoren von Strep. mitis SK138.